Hippocampal neuronen grote tote bag

Distributie van voorouderneuronen met EGFP van de Nr4a1/Nur77-promotor (Tg(Nr4a1-EGFP)GY139Gsat, www.gensat.org) met een label van 28K calbindin (red, Millipore, 1:200) en met een label van DAPI (blauw) naar show cellagen. De expressie van EGFP werd versterkt met anti-GFP voor kippen (Abcam, 1:2000). Calbindine 28K markeert de hippocampal interneuroncellichamen en een aantal piramidale cellen in de cornus amonus (CA) gebieden maar etiketteert ook de mossy vezelprojecties van de gedetineerde granulecellen naar CA3. Nr4a1-EGFP wordt voornamelijk uitgedrukt door CA1-piramidale cellen en in mindere mate door CA3-piramidale cellen en dunne cellen in de gyrus dentate. CA1 pyramidale-celdendrieten zijn prominent aanwezig in stratum radiatum, terwijl dense plexus ook cadeau is in het stratum lacunosum moleculare. Sectie (40 um) werd opgezet met Fluoromount G en met een 5X, 0.15 NA Achroplan doelstelling op een Zeiss Axiovert microscoop in beeld gebracht. AF568 werd opgewekt bij 562/40 nm en de emissie werd opgevangen bij 624/40 nm met Semrockfilters en een enkele band dichroom (530-585 nm gereflecteerd, 601-800 nm verzonden). AF488 werd opgewekt bij 482/35 nm en de emissie werd opgevangen bij 536/40 nm met Semrockfilters en een enkele band dichroom (446-499 nm gereflecteerd, 513-735 nm verzonden). DAPI werd opgewekt bij 350/50 nm en de emissie werd verzameld bij 460/50 nm met een CLP400 dichroic (Chroma). De enige afbeeldingen werden gevangen voor elk kanaal gebruikend een Zeiss Axiocam MR CCD en pseudo-gekleurd gebruikend Axiovision. Lineaire achtergrondaftrekking werd gebruikt op het afbeelding in kwestie. Zie Davis en Puhl (2011), Pubmed ID 21305052 voor een gedetailleerd kleuringsprotocol en afbeeldingen van de EGFP-expressie in het striatum in deze stam. Dit afbeelding maakt deel uit van een reeks die de expressie van EGFP door de Nr4a1-promotor in de gehele hersenen karakteriseert.